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疏水作用色谱法

在疏水作用色谱法(HIC)中,弱非极性固定相与高浓度的盐的水溶液同时使用。该方法主要通过减少盐的浓度来分离蛋白。
在反相色谱中,蛋白通过与填料上烷基或芳基相互作用保留下来。

不同于反相色谱,在疏水反应色谱中上述官能团的密度较低,且蛋白分子只在一个或少数几个位置上吸附。
盐浓度较高时会产生吸附作用,但若加入低百分比浓度的有机溶剂降低盐浓度,则会产生脱附作用。
尽管二者均以疏水作用为基础,但HIC分离的选择性明显不同于反相LC。
相对于RPC,HIC的最高容量较低,但其优势在于:流动相条件(主要是含水流动相)通常不会破坏高阶蛋白质结构。

TSKgel HIC 色谱柱

TSKgel HIC 色谱柱由三种从低到高不同疏水性的配体(丁基、醚和苯基)键合在聚甲基丙烯酸酯上的填料组成的。
醚柱与苯基柱所用的聚甲基丙烯酸酯基树脂是一种多孔材料,孔径大小为1000A,排阻限为1,000,000道尔顿,能提供高载量与高上样量。TSKgel Butyl-NPR 是无孔基质。在该基质上,只有颗粒表面能进行吸附。较短的运行时间和良好的回收率使丁基柱成为高通量或QC分析的最佳选择。三种柱类型之间的比较请详见下图。

图 1. 常规HIC色谱柱和无孔HIC色谱柱的比较


粒径:
10、13、20 μm
孔径:
100 nm
pH 值范围: 2.0 - 12.0
官能团: Phenyl




货号
产品名称
粒径
柱身材质 内径(mm) 长度(cm)
0013063
TSKgel Phenyl-5PW
10 μm
Glass 5 5
0008804
TSKgel Phenyl-5PW
10 μm
Glass 8 7.5
0008808
Guardgel Kit for P/N  0008804

Glass

0018759
TSKgel Phenyl-5PW
10 μm
Stainless Steel 2 7.5
0007573
TSKgel Phenyl-5PW
10 μm
Stainless Steel 7.5 7.5
0007652
Guardgel Kit for P/N  0007573
Stainless Steel

0007656
TSKgel Phenyl-5PW
13 μm
Stainless Steel 21.5 15
0016095
Guardgel Kit for P/N 0007656 Stainless Steel
0020023
TSKgel BioAssist Phenyl
10 μm
PEEK 7.8 5


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